En el presente estudio se efectuó la validación de las siguientes metodologías utilizadas para el diagnóstico de Trichomonas vaginalis en flujo vaginal, en el laboratorio de Análisis Clínicos: 1) Coloración de Gram, 2) Examen en fresco entre porta y cubreobjetos 3) Coloración de May Grunwald-Giemsa. 4) Cultivo en medio de Diamond modificado (Menarini®) y 5) Cultivo en medio OXOID® CM-161. Se utilizaron 89 muestras de flujo vaginal extraído con hisopo estéril de fondo de saco, de mujeres que concurrieron al Servicio de Laboratorio del Hospital de Evacuación 181, de la ciudad de Bahía Blanca (Provincia de Buenos Aires) Argentina y cuyas edades oscilaban entre 25 y 55 años. Las muestras se colorearon con Gram, May Grunwald-Giemsa, se efectuaron observaciones en fresco entre porta y cubreobjetos, y fueron sembradas en los medios de Diamond (Menarini®) y OXOID® CM-161 e incubadas durante cinco días a 37ºC, en anaerobiosis. Los resultados obtenidos mostraron que el medio de cultivo Diamond (Menarini®) y el examen en fresco inmediato, para una prevalencia de enfermedad (Trichomonosis) del 29,21%, en nuestro laboratorio de diagnóstico, presentan una sensibilidad, valor predictivo del resultado negativo y valor global de la prueba similares: 80,7%; 92,64% y 94,38% respectivamente. Si las cuatro pruebas son efectuadas en paralelo, la sensibilidad que se obtiene es del 99,76%, con un valor predictivo del resultado negativo del 99,90%. Para el medio OXOID®, si bien el valor global de la prueba es similar, presenta una sensibilidad del 76,92%, ligeramente inferior al examen en fresco, aunque con diferencia estadística no significativa. La coloración de Gram presentó una sensibilidad diagnóstica de 19,23%. Concluimos que los medios de cultivo Diamond (Menarini®) y OXOID® CM 161 no mejoran el diagnóstico etiológico de trichomonosis con relación al examen en fresco y coloración de May Grunwald-Giemsa. La coloración de Gram no la recomendamos para investigar T. vaginalis, no obstante, de visualizarse el flagelado por la misma, puede informarse su hallazgo y no se necesitarían efectuar otros exámenes