El caballo mestizo de tiro chileno es un animal que se ha seleccionado para realizar trabajo de fuerza y resistencia con el fin de que presente una aptitud física adecuada a las funciones que debe desarrollar durante las diferentes labores agrícolas. A pesar de la importante contribución que estos animales realizan a las economías agrícolas de los países en vías de desarrollo, poco se conoce aún acerca de la adaptación muscular al trabajo de tracción. Generalmente, estos animales son sometidos a trabajos intensivos después de largos períodos de descanso y a diferencia de los caballos de deporte, no existe preocupación acerca de la aptitud física y preparación que ellos debieran tener previo al inicio de la temporada de trabajo. El objetivo del estudio fue analizar los principales cambios ultraestructurales que se observan en el músculo G. medius de los caballos mestizos de tiro chileno durante el trabajo de labranza al inicio de la temporada de trabajo agrícola después de un largo período de reposo. Para tal fin, se tomaron biopsias por punción percutánea al M. Gluteus medius, de 4 caballos mestizos de tiro chilenos, entre 10 y 12 años de edad, e inactivos por un período de 3 meses. Las muestras de músculo esquelético, se tomaron antes y después de una faena de labranza con arado se procesaron para microscopía electrónica de transmisión, según técnicas convencionales de corte fino. El análisis ultraestructural de los especímenes de músculo esquelético de los animales estudiados después de la actividad física, mostró cambios subletales como: alteraciones en el sistema contráctil (disminución de los miofilamentos), cambios en la densidad electrónica de las mitocondrias (mitocondrias hinchadas), presencia frecuente de estructuras lisosomales (principalmente gránulos de lipofuscina), engrosamiento de la membrana basal de los capilares y oclusión parcial de los mismos por la presencia de macrófagos y de prolongaciones hacia la luz del capilar. Los resultados sugieren una relación directa entre el ejercicio físico desacostumbrado y las alteraciones en la estructura del músculo esquelético en respuesta a dicha actividad