El objetivo del estudio fue identificar la prevalencia de infección con Trypanosoma cruzi en zarigüeyas (Didelphis virginiana) y Pic (Triatoma dimidiata) capturados en áreas urbanas de la ciudad de Campeche, México. Se colectaron 25 zarigüeyas con una prevalencia de infección con T. cruzi del 52% (13/25). También se colectaron 36 vectores de Pic con una prevalencia de infección del 41,6% (15/36) con T. cruzi. Todos los aislados de T. cruzi fueron TcI de acuerdo con la predominancia de este linaje en México independientemente del huésped mamífero o vector.The aim of this study was to identify the infection prevalence of Trypanosoma cruzi in opossums and triatomines captured in urban areas of Campeche City, Mexico. We collected 25 specimens of marsupials of Virginia opossums (Didelphis virginiana) species showing a T. cruzi infection prevalence of 52% (13/25). Also, 36 specimens of Pic (Triatoma dimiata) vectors were collected, showing a T. cruzi infection prevalence of 41.6% (15/36). All T. cruzi isolates were TcI, which correspond to the predominant lineage in mammals of Mexico, irrespective of the mammalian host species or vector.