Colobanthus quitensis is one of the two native vascular plants that inhabit Antarctica. In addition, it spreads from the south of Mexico to the north of the Antarctic Peninsula and from 0 to 4200 m asl, always in extreme habitats. It is considered a model species for abiotic stress studies. Due to its small size and low accessibility to its habitats, efficient propagation methods are required to maintain it in the laboratory. The aim of this work was to optimize some critical parameters in the in vitro propagation of this species related to physical and chemical aspects to avoid negative effects such as explants yellowing and death and improve the conditioning of new plantlets, as well as response to different hormonal combinations. Explants from previously established in vitro seedlings were used. When the vessels were covered with a double layer of aluminum foil, water loss in the medium and the tissues was avoided, as well as the yellowing of the buds was reduced. The addition of silver thiosulfate to the medium stimulated the regeneration of buds and roots, and at a concentration of 10 ?M inhibited the yellowing and death, of buds by 50% and 25%, respectively. At 28 days of culture in the glass vessels, 49% less yellowing was observed, 7% more new buds and 24% more roots than in the Magenta box. The light intensity between 28-45 ?mol m-2 s-1 decreased the negative effects and stimulated regeneration. C. quitensis responds to different hormonal combinations, but more studies are needed to establish the optimal combination for the individuals originated from different habitats.Colobanthus quitensis es una de las dos plantas vasculares nativas que habitan en la Antártica. Además, se distribuye desde el sur de México hasta el norte de la Península Antártica y desde los 0 hasta los 4.200 m s.n.m., siempre en hábitats extremos. Es considerada una especie modelo para estudios en estrés abióticos. Debido a su pequeño tamaño y la poca accesibilidad a sus hábitats es necesario disponer de métodos eficientes de propagación para mantenerla en el laboratorio. El objetivo del presente trabajo fue optimizar algunos parámetros críticos en la propagación in vitro de esta especie relacionados con aspectos físicos y químicos para evitar efectos negativos como el amarillamiento y muerte de explantes y mejorar el condicionamiento de las nuevas plántulas, así como la respuesta a diferentes combinaciones hormonales. Se utilizaron explantes provenientes de plántulas previamente establecidas in vitro. La cobertura de los frascos con doble capa de papel aluminio evitó la pérdida de agua en el medio y en los tejidos, así como también disminuyó el amarillamiento de los brotes. La adición de tiosulfato de plata al medio estimuló la regeneración de brotes y raíces, en la concentración de 10 ?M inhibió en un 50% y un 25% el amarillamiento y muerte de brotes, respectivamente. A los 28 días de cultivo en el frasco de vidrio se observó 49% menos de amarillamiento, 7% más de nuevos brotes y 24% de raíces que en la caja Magenta. La intensidad lumínica entre los 28-45 ?mol m-2 s-1 disminuyó los efectos negativos y estimuló la regeneración. C. quitensis responde a diferentes combinaciones hormonales, pero más estudios son necesarios para establecer la combinación óptima para los individuos provenientes de los diferentes hábitats.