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INMUNODIAGNOSTICO DE FASCIOLOSIS BOVINA MEDIANTE ELISA Y WESTERN BLOT

Author
Gorman,Texia

Sanchez,Roxana

Fredes,Fernando

Alcaino,Hector

Full text
http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716-07201998000100003
Abstract
Se evaluó y caracterizó la respuesta inmune humoral de bovinos naturalmente infectados con Fasciola hepatica frente a un extracto total de antígenos de excreción-secreción (E-S) y a una fracción antigénica semipurificada cromatográficamente (<30 kDa), seleccionada previamente por su eficiencia diagnóstica en otras especies. Ambos preparados antigénicos fueron analizados mediante ELISA en microplaca y electroforesis en geles de poliacrilamida en condición de denaturación (SDS-PAGE) y posterior inmuno-electrotransferencia enzimática o Western blot. Para ello se emplearon 52 sueros de bovinos con fasciolosis comprobada mediante examen post mortem, 18 sueros de animales sin la infección y 48 sueros de vacunos infectados con hidatidosis, perosin fasciolosis. La sensibilidad y especificidad obtenidas en el ELISA con el extracto crudo E-S fueron de 53% y 100%, respectivamente, en tanto que con la fracción semipurificada a igual especificidad (100%) se presentó una sensibilidad mayor ( 90%). A través de Western blot, empleando el extracto antigénico total E-S hubo un reconocimiento específico de bandas correspondientes a los 14, 22, 27-29 y 37-38 kDa. Las bandas de 37-38 y 27-29 kDa destacaron por su sensibilidad y frecuencia, identificadas por el 90% y 100% de los infectados, respectivamente. Con el antígeno semipurificado, se evidenció una banda polipeptídica de 28-30 kDa, reconocida por todos los sueros con fasciolosis. Los resultados demuestran, por un lado, la existencia de diversas fracciones polipeptídicas que potencialmente pueden ser promisorias en el inmunodiagnóstico de fasciolosis bovina
Metadata
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