Very low birth weight (VLBW) preterm newborns lack some nutrients such as vitamin D (VD), which is important in the function and development of different systems. Objective: To evaluate serum levels of 25-OH-VD in VLBW newborns and to describe the possible association between its deficit and frequent morbidities in this population. Patients and Methods: Cross-sectional study of VLBW newborns (< 1,500 g and/or < 32 weeks of gestational age). A single measurement of serum 25-OH-VD levels was performed in the first 72 hours of postnatal life (chemiluminescent immunoassay). Perinatal characteristics, treatments performed, and frequent comorbidities were analyzed. Deficiency of 25-OH-VD was defined as levels ≤ 20 ng/ml, determining a statistical association between this and various comorbidities at hospital discharge in the neonatal period. Results: 46 preterm newborns were evaluated. The mean serum level of 25-OH-VD was 19.7 ± 6.7 ng/ml. 52.2% (24/46) presented deficient levels, with lower values observed at lower gestational age (p = 0.01). There was an association between 25-OH-VD deficiency, the need for conventional mechanical ventilation (p = 0.04), and longer hospital stay (p < 0.01). There was an association with the presence of hemodynamically significant ductus arteriosus (p < 0.01). Conclusions: Deficiency of 25-OH-VD was frequent in VLBW newborns, with lower levels at lower gestational age. There was an association between 25-OH-VD deficiency, hospital stay, need for respiratory support, and patent ductus arteriosus.Los recién nacidos prematuros de muy bajo peso al nacer (RNMBPN), carecen de algunos nutrientes como la vitamina D (VD), importante en la función y desarrollo de diferentes sistemas. Objetivo: Evaluar los niveles de séricos de 25-OH-VD en RNMBPN y describir la posible asociación entre su déficit y morbilidades frecuentes en esta población. Pacientes y Método: Estudio transversal de RNMBPN (< 1.500 g y/o < 32 semanas de edad gestacional). Se realizó medición única de niveles séri- cos de 25-OH-VD en las primeras 72 horas de vida post-natal (inmunoensayo quimioluminiscente). Se analizaron características perinatales, tratamientos efectuados y comorbilidades frecuentes. El déficit de 25-OH-VD se definió con niveles ≤ 20 ng/ml, y se determinó asociación estadística entre éste y diversas comorbilidades al alta hospitalaria en su período neonatal. Resultados: Se evaluaron 46 neonatos prematuros. El nivel sérico promedio de 25-OH-VD fue 19,7 ± 6,7 ng/ml. Un 52,2% (24/46) presentó niveles deficitarios, observándose valores más bajos a menor edad gestacional (p = 0,01). Se observó asociación entre el déficit de 25-OH-VD, la necesidad de ventilación mecánica convencional (p = 0,04), y mayor estadía hospitalaria (p < 0,01). Existió asociación con la presencia de ductus arterioso hemodinámicamente significativo (p < 0,01). Conclusiones: El déficit de 25-OH-VD fue frecuente en RNMBPN, existiendo menores niveles a menor edad gestacional. Se observó asociación entre el déficit de 25-OH-VD, la estadía hospitalaria, necesidad de soporte respiratorio, y el ductus arterioso persistente.