Introducción. El Hospital de niños Dr. Exequiel González Cortés aplicó la estrategia multimodal para mejorar la adhesión a la higiene de manos propuesta por la Organización Mundial de la Salud. El objetivo fue aplicar el Marco de Autoevaluación de la Higiene de Manos y evaluar el efecto sobre la adhesión a la higiene de manos y algunos indicadores de Infecciones Asociadas a la Atención en Salud. Material y Método. Estudio observacional aplicado entre el año 2013 y 2015, se midió el cumplimiento de los estándares en higiene de manos según el “Marco de autoevaluación de la Higiene de Manos” de la OMS en el contexto del Premio Latinoamericano a la Excelencia e Innovación en la Higiene de Manos 2015-2016. Resultados. La autoevaluación inicial de higiene de manos fue de 38,8 puntos y al final de la evaluación aumento a 270 puntos (p<0,05). La adhesión a higiene de manos aumentó de 48% a 62% en relación a la oportunidad (p<0,05), la tasa de incidencia global de infecciones asociadas a la atención disminuyó de 1,9 a 1,7 por 100 egresos y la tasa de incidencia de gastroenteritis agudas intrahospitalarias disminuyeron de 3,24 a 2,13 por 1000 días lactante menor de 2 años (p<0,05). Conclusiones. La implementación de una intervención multimodal mejoró significativamente la adhesión al lavado de manos y se observó un resultado positivo en los indicadores de incidencia de infecciones asociadas a la atención de salud.