En este trabajo se propone un método por espectrofotometría derivada para la microdeterminación de hierro a niveles de sub-myg/L. El TPTZ (2,4,6-tripiridil-1,3,5-triazina) fue usado como reactivo cromóforo para formar a pH = 5,0 un complejo azul, el cual es retenido y concentrado sobre una resina sp sephadex C-25 de intercambio catiónico. Se incluye una discusión de las variables experimentales que influyen sobre la retención del complejo sobre sp sephadex C-25. Las señales en unidades derivativas fueron medidas directamente en una resina, empaquetada en una celda espectrofotométrica de paso de luz de 1 mm. En la segunda derivada de los espectros, la amplitud de la señal a 660 nm es característica del complejo Fe(II)-TPTZ retenido en la resina y es útil para la determinación cuantitativa de hierro ( 0,241-120 ng/mL; DER < 2,7 %). El método fue aplicado en la determinación de hierro en diferentes tipos de agua