Phytopathogenic fungi attack many agricultural crops such as yerba mate (Ilex paraguariensisSaint Hil.). An innovative alternative for pest control is the use of biocontrol fungi of Trichodermagenus. The objectives of the present work were to isolate the fungal agents that cause foliarlesions in yerba mate, and to evaluate the antagonistic capacity of native Trichoderma sp. isolatesagainst pathogens in this crop. From diseased plant-tissues, a phytopathogenic fungus belongingto Alternaria alternata species was isolated and identified morphologically and molecularly.Pathogenicity assays were done on yerba mate plants in triplicate. Superficial mechanical lesionswere made on them and the phytopathogenic isolation obtained (conidia and mycelium) wasinoculated to evaluate their phytopathogenic capacity. New dual culture methods were determinedto evaluate in vitro antagonism of Trichoderma. The in vitro biocontrol capacity of 30 Trichodermaisolates was evaluated against the phytopathogenic isolation obtained. As a positive control, a strainisolated from a commercial fungicide product based on T. harzianum was used. It was determinedthat 18 of the 30 isolates of Trichoderma inhibited the growth of the phytopathogen A. alternata bymore than 50%, and presented statistically significant differences with respect to the positive control.These results confirm the effectiveness of using native biocontrol isolates adapted to the climatic andsoil conditions where the phytopathogenic microorganisms are foundLos hongos fitopatógenos afectan a cultivos agrícolas, como la yerba mate (Ilex paraguariensis SaintHil.). Una alternativa innovadora para el control de plagas es el empleo de hongos biocontroladoresdel género Trichoderma. Los objetivos del presente trabajo fueron aislar los agentes fúngicoscausantes de lesiones foliares en yerba mate, y evaluar la capacidad antagónica de los aislamientosnativos de Trichoderma sp. frente a patógenos en este cultivo. A partir del corte, desinfección ysiembra del tejido vegetal enfermo, se aisló e identificó morfológica y molecularmente un hongofitopatógeno perteneciente a la especie Alternaria alternata. Se ensayaron pruebas de patogenicidaden plantas de yerba mate por triplicado. Se realizaron lesiones mecánicas superficiales en ellas yse inoculó el aislamiento fitopatógeno obtenido (conidios y micelio) para evaluar su capacidadfitopatógena. Se determinaron nuevas variantes de cultivo dual para evaluar la capacidad antagónicabiocontroladora en condiciones in vitro. Se evaluó la capacidad biocontroladora in vitro de 30aislamientos de Trichoderma frente al aislamiento fitopatógeno obtenido. Como control positivo seutilizó una cepa aislada de un producto fungicida comercial a base de T. harzianum. Se determinóque 18 de los 30 aislamientos de Trichoderma lograron inhibir en más del 50% el crecimiento delfitopatógeno A. alternata y presentaron diferencias estadísticamente significativas con respecto al control positivo. Estos resultados reafirman la efectividad de utilizar aislamientos biocontroladoresnativos ya adaptados a las condiciones edafo-climáticas del ambiente en donde se encuentra elmicroorganismo fitopatógeno a controlar biológicamente.