Medicinal plants have been used by various cultures since pre-Hispanic times in Mexico. In this study, the use of medicinal plants in the old neighborhoods of Guadalajara, Jalisco, Mexico is described. 137 species, 130 genera and 68 families were recorded. 34% of the species belong to Asteraceae, Lamiaceae, Malvaceae and Fabaceae families. The neighborhoods of Mexicaltzingo and San Juan de Dios are the most related to the knowledge and use of medicinal plants, while El Santuario is the least similar to the rest. The diversity of uses of medicinal plants according to the Shannon index is high (between 3.0 and 4.92). The Use Value Index showed that Matricaria chamomilla L. was the species that obtained the highest value (0.28), followed by Gnaphalium americanum Mill. (0.23). The age group between 51 and 85 years old has greater knowledge about medicinal plants and their uses.Las plantas medicinales han sido utilizadas por diversas culturas desde tiempos prehispánicos en México. En este estudio, se describe el uso de plantas medicinales en los barrios antiguos de Guadalajara, Jalisco, México. Se registraron 137 especies, 130 géneros y 68 familias. El 34% de las especies pertenece a las familias Asteraceae, Lamiaceae, Malvaceae y Fabaceae. Los barrios de Mexicaltzingo y San Juan de Dios son los más parecidos en cuanto al conocimiento y uso de plantas medicinales, mientras que El Santuario es el menos afín al resto. La diversidad de usos de las plantas medicinales de acuerdo con el índice de Shannon es alta (entre 3.0 y 4.92). El Índice de Valor de Uso mostró que Matricaria chamomilla L. fue la especie que obtuvo el máximo valor (0.28), seguida de Gnaphalium americanum Mill. (0.23). El grupo de entre 51-85 de edad posee mayor conocimiento sobre las plantas medicinales y sus usos.