Objective: To know the frequency of environmental mycobacterium isolations in Chile in the year 2008. Methods: 600 AFB (acid fast bacilli) positive cultures from 22 laboratories of Tuberculosis Bacteriology of the different Network Health Services that constitute the Tuberculosis Control Program of the country were studied, during four months at 2008. 545 (90.8%) were pulmonary and 55 (9.2%) extra pulmonary. Acidfast bacilli smears were confirmed by Ziehl Neelsen and identification of mycobacteria species or complex were identified by traditional tests according to Runyon classification and biochemical tests, genetic probes and pattern analysis restriction (PRA). Results: 585 cultures were appropriated for inclusion in the study. In 91.3% (n = 534) of the cases Mycobacterium tuberculosis was isolated while 0.3% was Mycobacterium bovis subspecie BCG (n = 3) and 8.4% (n = 48) corresponded to environmental mycobacterium. Of the latter, Mycobacterium kansasii (2.6%), Mycobacterium avium-intracellulare (1.5%) and Mycobacterium chelonae (1.0%) were the most commonly isolated. Conclusion: According to the figures of this study and comparing them with studies ofprevious years (1988 and 1998) it is concluded that the number of environmental mycobacterium isolated has been relatively constant during the last decade, as well as the species, more commonly isolated.Objetivos: Conocer la frecuencia de aislamientos de micobacterias ambientales en Chile en el año 2008. Material y Métodos: Se recibieron 600 cultivos desde 22 laboratorios de Bacteriología de la Tuberculosis de los distintos Servicios de Salud de la red que comprende el Programa de Control de la Tuberculosis del país, durante un período de cuatro meses del año 2008. Quinientos cuarenta y cinco (90,8%) correspondieron a localización pulmonar y 55 (9,2%) a extrapulmonar. Se confirmó la alcohol-ácido resistencia por tinción de Ziehl Neelsen y para la identificación de especies o complejos micobacterianos se utilizaron pruebas tradicionales y bioquímicas de acuerdo al criterio de clasificación de Runyon, sondas genéticas y análisis de patrones de restricción (PRA). Resultados: De los 600 cultivos recibidos, 585fueron aptos para ser incluidos en el estudio. De éstos, en el 91,3% (n = 534) de los casos se aisló Mycobacterium tuberculosis, en un 0,3% Mycobacterium bovis subespecie BCG (n = 3) y un 8,4% (n = 48) correspondió a micobacterias ambientales. De estas últimas, Mycobacterium kansasii (2,6%), Mycobacterium avium-intracellulare (1,5%) y Mycobacterium chelonae (1,0%) fueron las más comúnmente aisladas. Conclusiones: De acuerdo a las cifras obtenidas en este estudio y comparadas con estudios de años anteriores (1988 y 1998) se concluye que el número de aislamientos de micobacterias ambientales permaneció relativamente constante esta última década, como también las especies más comúnmente aisladas.