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Intratracheal instillation of elastase in the rat: Electrophoretical changes of alphal-antitrypsin in bronchoalveolar lavage fluid

Instilación intratraqueal de elastasa en la rata: Cambios electroforéticos de la á1-AT-antitripsina en el lavado broncoalveolar

Author
VECCHIOLA C, ANDREA

RAMÍREZ M, ALEJANDRO

VILLAGRÁN T, ANDREA

SERRANO H, CAROLINA

LIBERONA T, LEONEL

SÁEZ S, CLAUDIA

BORZONE T, GISELLA

Full text
https://revchilenfermrespir.cl/index.php/RChER/article/view/548
Abstract
Introduction: Endogenous alphal-antitrypsin ( á1-AT) is the main inhibitor of the intratracheally instilled elastase in experimental animals. Objective: To evaluate by electrophoresis and immunodetection using western blot analysis, the different forms of á1-AT in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) of Sprague Dawley rats after intratracheal instillation of elastase, with the hypothesis that the previously observed increment in antielastase activity is due to high levels of active á1-AT. Results: In the first hours after elastase instillation the concentration of á1-AT increases more than seven times due to an increase in alveolar-capillary permeability. á1-AT in BAIF is found as the native protein (~ 52 kDa), as complexes of different molecular sizes (&gt; 75 kDa and &gt; 100 kDa) and as a proteolytic product (< 40 kDa). Conclusion: In spite of a high proportion of á1-AT in the inactive form as part of different complexes, the increase in alveolar-capillary permeability after elastase treatment contributes to maintain high levels of active á1-AT. These results could be of importance in other inflammatory lung processes.
 
Introducción: la antiproteasa alfa 1-antitripsina ( á1-AT) constituye el principal inhibidor endógeno de la elastasa instilada por vía intratraqueal en modelos experimentales. Objetivo: Evaluar mediante electroforesis e inmunodetección por western blot, las distintas formas en que se encuentra la á1-AT en el lavado broncoalveolar (IBA) de ratas Sprague Dawley después de la instilación de elastasa, con la hipótesis de que el aumento en la actividad antielastasa previamente encontrada se acompaña de niveles altos de á1-AT activa. Resultados: En las primeras horas post-elastasa la concentración de á1-AT en el IBA aumenta más de 7 veces, debido al aumento de la permeabilidad alvéolo-capilar, encontrándose tanto como proteína nativa (~ 52 kDa), como parte de complejos de mayor tamaño (&gt; 75 kDa y &gt; 100 kDa) y como producto de proteólisis (< 40 kDa). Conclusión: A pesar de existir una alta proporción de á1-AT inactiva formando complejos, el aumento de la permeabilidad alvéolo-capilar contribuye a mantener niveles altos de á1-AT activa. Estos resultados podrían ser extrapolables a distintos procesos inflamatorios pulmonares.
 
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