Resumo: O objetivo deste estudo foi comparar entre os gêneros a prevalência de barreiras e sua associação com a prática de atividades físicas em servidores de uma faculdade do Distrito Federal. Trata-se de um estudo transversal com 270 servidores administrativos de uma facul dade do Distrito Federal, Brasil, desenvolvido entre outubro de 2016 a maio de 2017. Foram coletadas informações sociodemográficas, prática de atividade física e barreiras percebidas. As barreiras foram analisadas individualmente e agrupadas em domínios (ambiental, comportamental, físico e social). Associações entre barreiras percebi das (por domínios) e prática de atividades físicas foram testadas por meio de Regressão de Poisson. Resultados: As principais barreiras percebidas pelos servidores, de ambos os gêneros, foram jornada de trabalho extensa (mulheres = 33,9%, homens= 24,1%), falta de ener gia (mulheres= 17,3%, homens= 14,9%). As mulheres e os homens que percebiam barreiras sociais para a prática de atividade física apresentaram, probabilidade maior (OR=2,13; IC95%= 1,08-5,40; OR=1,92; IC95%=0,87-4,88, respectivamente) de serem inativos fisicamente. As barreiras físicas estiveram associadas à inatividade física nas mulheres (OR= 1,82; IC95%=1,41-4,47). As barreiras do domínio social estiveram associadas à inatividade física, para ambos os gêne ros. O desenvolvimento de políticas públicas saudáveis com o propó sito de aumentar o estímulo a prática de atividade física.