En la presente investigación se evaluó el efecto en la motilidad y fertilidad espermática de trucha arcoiris (Oncorhynchus mykiss) de una solución salina 0,98% de NaCl enriquecida con 2,5; 5,0; 10,0 y 20,0mM de cafeína, utilizando como control una solución salina sin cafeína. Al utilizar cafeína en concentraciones de 10mM en la solución activadora se duplicó la duración de la motilidad espermática (165,0 ± 18,8s) con respecto al control (80,0 ± 12,5s). Se registró un aumento de la fertilidad al utilizar cafeína en el activador, aunque los valores no fueron estadísticamente significativos con respecto al control (81,6 ± 5,7%). Estos antecedentes demuestran la capacidad de la cafeína de prolongar la motilidad espermática en trucha arcoiris, aún cuando se debe continuar con nuevos ensayos que permitan determinar las dosis mínimas de cafeína requeridas para ser utilizadas en sistemas de producción masivos.